Нова терапија аутологним ћелијама коришћењем плазме богате тромбоцитима (ПРП) може играти помоћну улогу у различитим плановима лечења регенеративним лековима.Постоји глобална незадовољена потражња за стратегијама поправке ткива за лечење пацијената са мускулоскелетним (МСК) и болестима кичме, остеоартритисом (ОА) и хроничним сложеним и рефракторним ранама.ПРП терапија се заснива на чињеници да фактор раста тромбоцита (ПГФ) подржава зарастање рана и каскаду поправке (упала, пролиферација и ремоделирање).Бројне различите ПРП формулације су процењене у студијама на људима, ин витро и животињама.Међутим, препоруке ин витро и студија на животињама обично доводе до различитих клиничких резултата, јер је тешко превести неклиничке резултате истраживања и препоруке метода у клиничко лечење људи.Последњих година постигнут је напредак у разумевању концепта ПРП технологије и биолошких агенаса, а предложена су нова упутства за истраживање и нове индикације.У овом прегледу ћемо разговарати о најновијем напретку у припреми и саставу ПРП-а, укључујући дозу тромбоцита, активност леукоцита и урођену и адаптивну имунолошку регулацију, ефекат 5-хидрокситриптамина (5-ХТ) и ублажавање болова.Поред тога, разговарали смо о ПРП механизму који се односи на упалу и ангиогенезу током поправке и регенерације ткива.На крају ћемо размотрити ефекте неких лекова на ПРП активност.
Аутологна плазма богата тромбоцитима (ПРП) је течни део аутологне периферне крви након третмана, а концентрација тромбоцита је виша од почетне вредности.ПРП терапија се користи за различите индикације више од 30 година, што је резултирало великим интересовањем за потенцијал аутогеног ПРП-а у регенеративној медицини.Термин ортопедски биолошки агенс је недавно уведен за лечење мускулоскелетних (МСК) болести и постигао је обећавајуће резултате у способности регенерације хетерогених биоактивних мешавина ПРП ћелија.Тренутно је ПРП терапија одговарајућа опција лечења са клиничким предностима, а пријављени резултати пацијената су охрабрујући.Међутим, недоследност резултата пацијената и нови увиди су поставили изазове за изводљивост клиничке примене ПРП-а.Један од разлога може бити број и варијабилност ПРП и ПРП система на тржишту.Ови уређаји се разликују по обиму сакупљања ПРП-а и шеми припреме, што резултира јединственим карактеристикама ПРП-а и биолошким агенсима.Поред тога, недостатак консензуса о стандардизацији шеме припреме ПРП-а и потпуног извештаја о биолошким агенсима у клиничкој примени довели су до недоследних резултата извештаја.Учињено је много покушаја да се карактерише и класификује ПРП или производи добијени из крви у применама регенеративне медицине.Поред тога, деривати тромбоцита, као што су лизати људских тромбоцита, предложени су за ортопедска и ин витро истраживања матичних ћелија.
Један од првих коментара о ПРП-у објављен је 2006. Главни фокус овог прегледа је функција и начин деловања тромбоцита, ефекат ПРП-а на сваку фазу каскаде зарастања и кључна улога фактора раста који потиче од тромбоцита. у различитим ПРП индикацијама.У раној фази ПРП истраживања, главно интересовање за ПРП или ПРП-гел било је постојање и специфичне функције неколико фактора раста тромбоцита (ПГФ).
У овом раду ћемо опширно расправљати о најновијем развоју различитих структура ПРП честица и рецептора мембране тромбоцитних ћелија и њиховим ефектима на урођену и адаптивну регулацију имуног система.Поред тога, детаљније ће бити размотрена улога појединачних ћелија које могу постојати у бочици за ПРП третман и њихов утицај на процес регенерације ткива.Поред тога, биће описан најновији напредак у разумевању биолошких агенаса ПРП, дозе тромбоцита, специфичних ефеката специфичних белих крвних зрнаца и ефеката концентрације ПГФ-а и цитокина на нутритивне ефекте мезенхималних матичних ћелија (МСЦ), укључујући ПРП циљање различитих окружење ћелија и ткива након трансдукције ћелијског сигнала и паракриних ефеката.Слично томе, разговараћемо о ПРП механизму који се односи на упалу и ангиогенезу током поправке и регенерације ткива.На крају ћемо размотрити аналгетички ефекат ПРП-а, ефекат неких лекова на активност ПРП-а и комбинацију ПРП-а и програма рехабилитације.
Основни принципи клиничке терапије плазмом богатом тромбоцитима
ПРП препарати су све популарнији и широко се користе у различитим медицинским областима.Основни научни принцип ПРП третмана је да ињекција концентрованих тромбоцита на месту повреде може да покрене поправку ткива, синтезу новог везивног ткива и реконструкцију циркулације крви ослобађањем многих биолошки активних фактора (фактора раста, цитокина, лизозома) и адхезиони протеини одговорни за покретање хемостатске каскадне реакције.Поред тога, протеини плазме (нпр. фибриноген, протромбин и фибронектин) су присутни у компонентама плазме сиромашним тромбоцитима (ППП).ПРП концентрат може стимулисати хиперфизиолошко ослобађање фактора раста како би се започело зарастање хроничне повреде и убрзао процес поправке акутне повреде.У свим фазама процеса поправке ткива, различити фактори раста, цитокини и локални регулатори деловања промовишу већину основних ћелијских функција преко ендокриних, паракриних, аутокриних и ендокриних механизама.Главне предности ПРП-а укључују његову сигурност и генијалну технологију припреме тренутне комерцијалне опреме, која се може користити за припрему биолошких агенаса који се могу широко користити.Што је најважније, у поређењу са уобичајеним кортикостероидима, ПРП је аутогени производ без познатих нежељених ефеката.Међутим, не постоји јасна регулатива о формули и саставу ињекционог ПРП састава, а састав ПРП има велике промене у тромбоцитима, садржају белих крвних зрнаца (ВБЦ), загађењу црвених крвних зрнаца (РБЦ) и концентрацији ПГФ.
ПРП терминологија и класификација
Деценијама је развој ПРП производа који се користе за стимулисање поправке и регенерације ткива био важно поље истраживања биоматеријала и науке о лековима.Каскада зарастања ткива укључује многе учеснике, укључујући тромбоците и њихове факторе раста и грануле цитокина, бела крвна зрнца, фибрински матрикс и многе друге синергистичке цитокине.У овом каскадном процесу ће се десити сложени процес коагулације, укључујући активацију тромбоцита и накнадну дензификацију и α- ослобађање садржаја честица тромбоцита, агрегацију фибриногена (ослобођеног тромбоцитима или слободног у плазми) у фибринску мрежу и формирање тромбоцитне емболије.
„Универзални“ ПРП симулира почетак зарастања
У почетку се израз „плазма богата тромбоцитима (ПРП)“ називао концентрат тромбоцита који се користио у медицини за трансфузију крви, а користи се и данас.У почетку, ови ПРП производи су коришћени само као адхезив за фибринско ткиво, док су тромбоцити коришћени само за подршку јачој полимеризацији фибрина да би се побољшало заптивање ткива, а не као стимуланс зарастања.Након тога, ПРП технологија је дизајнирана да симулира почетак каскаде зарастања.Након тога, ПРП технологија је сажета кроз њену способност увођења и ослобађања фактора раста у локално микроокружење.Овај ентузијазам за испоруку ПГФ-а често скрива важну улогу других компоненти у овим крвним дериватима.Овај ентузијазам је додатно појачан због недостатка научних података, мистичних веровања, комерцијалних интереса и недостатка стандардизације и класификације.
Биологија ПРП концентрата је сложена као и сама крв и може бити сложенија од традиционалних лекова.ПРП производи су живи биоматеријали.Резултати клиничке примене ПРП зависе од интринзичних, универзалних и адаптивних карактеристика крви пацијента, укључујући разне друге ћелијске компоненте које могу постојати у ПРП узорку и локалном микроокружењу рецептора, које може бити у акутном или хроничном стању.
Резиме збуњујуће ПРП терминологије и предложеног система класификације
Дуги низ година, практичари, научници и компаније су мучени почетним неразумевањем и недостацима ПРП производа и њиховим различитим терминима.Неки аутори дефинишу ПРП као само тромбоците, док су други истакли да ПРП садржи и црвена крвна зрнца, разна бела крвна зрнца, фибрин и биоактивне протеине са повећаном концентрацијом.Због тога су многи различити биолошки агенси за ПРП уведени у клиничку праксу.Разочаравајуће је што у литератури обично недостаје детаљан опис биолошких агенаса.Неуспех стандардизације припреме производа и каснији развој система класификације довели су до употребе великог броја ПРП производа описаних различитим терминима и скраћеницама.Није изненађујуће да промене у ПРП препаратима доводе до недоследних исхода пацијената.
Кингслеи је први пут употребио термин „плазма богата тромбоцитима” 1954. Много година касније, Ехренфест ет ал.Предложен је први систем класификације заснован на три главне варијабле (садржај тромбоцита, леукоцита и фибрина), а многи ПРП производи су подељени у четири категорије: П-ПРП, ЛР-ПРП, чисти фибрин богат тромбоцитима (П-ПРФ) и леукоцити богат ПРФ (Л-ПРФ).Ови производи се припремају потпуно аутоматским затвореним системом или ручним протоколом.У међувремену, Евертс ет ал.Наглашен је значај помињања белих крвних зрнаца у ПРП препаратима.Такође препоручују употребу одговарајуће терминологије за означавање неактивних или активираних верзија ПРП препарата и тромбоцитног гела.
Делонг ет ал.предложио ПРП систем класификације назван тромбоцити, активирана бела крвна зрнца (ПАВ) на основу апсолутног броја тромбоцита, укључујући четири опсега концентрације тромбоцита.Остали параметри укључују употребу активатора тромбоцита и присуство или одсуство белих крвних зрнаца (тј. неутрофила).Мисхра и др.Предлаже се сличан систем класификације.Неколико година касније, Маутнер и његове колеге описали су разрађенији и детаљнији систем класификације (ПЛРА).Аутор је доказао да је важно описати апсолутни број тромбоцита, садржај белих крвних зрнаца (позитиван или негативан), проценат неутрофила, еритроците (позитиван или негативан) и да ли се користи егзогена активација.У 2016. години, Магалон и др.Објављена је ДЕПА класификација заснована на дози ињекције тромбоцита, ефикасности производње, чистоћи добијеног ПРП-а и процесу активације.Након тога, Лана и њене колеге увеле су МАРСПИЛЛ систем класификације, фокусирајући се на мононуклеарне ћелије периферне крви.Недавно је Комитет за научну стандардизацију заговарао употребу система класификације Међународног друштва за тромбозу и хемостазу, који се заснива на низу консензусних препорука за стандардизацију употребе тромбоцитних производа у применама регенеративне медицине, укључујући замрзнуте и одмрзнуте тромбоцитне производе.
На основу система класификације ПРП-а који су предложили различити практичари и истраживачи, многи неуспешни покушаји да се стандардизује производња, дефиниција и формула ПРП-а које ће користити клиничари могу да извуку прави закључак, што се вероватно неће десити у наредних неколико година. , технологија клиничких ПРП производа наставља да се развија, а научни подаци показују да су за лечење различитих патологија под специфичним условима потребни различити ПРП препарати.Стога очекујемо да ће параметри и варијабле идеалне ПРП производње наставити да расту у будућности.
ПРП метода припреме је у току
Према ПРП терминологији и опису производа, постоји неколико система класификације за различите ПРП формулације.Нажалост, не постоји консензус о свеобухватном систему класификације ПРП или било које друге аутологне крви и крвних производа.У идеалном случају, систем класификације треба да обрати пажњу на различите ПРП карактеристике, дефиниције и одговарајућу номенклатуру у вези са одлукама о лечењу пацијената са специфичним болестима.Тренутно, ортопедске примене деле ПРП у три категорије: чисти фибрин богат тромбоцитима (П-ПРФ), ПРП богат леукоцитима (ЛР-ПРП) и ПРП са недостатком леукоцита (ЛП-ПРП).Иако је специфичнија од опште дефиниције ПРП производа, категоријама ЛР-ПРП и ЛП-ПРП очигледно недостаје било каква специфичност у садржају белих крвних зрнаца.Због својих имунолошких и одбрамбених механизама домаћина, бела крвна зрнца су у великој мери утицала на интринзичну биологију хроничних болести ткива.Стога, ПРП биолошки агенси који садрже специфична бела крвна зрнца могу значајно унапредити имунолошку регулацију и поправку и регенерацију ткива.Тачније, лимфоцити су у изобиљу у ПРП-у, производећи фактор раста сличан инсулину и подржавајући ремоделирање ткива.
Моноцити и макрофаги играју кључну улогу у процесу имунолошке регулације и механизму поправке ткива.Значај неутрофила у ПРП-у је нејасан.ЛП-ПРП је одређен као први ПРП препарат систематском евалуацијом да би се постигли ефикасни резултати лечења зглобне ОА.Међутим, Лана и др.Супротставља се употреби ЛП-ПРП у лечењу ОА колена, што указује на то да специфична бела крвна зрнца играју важну улогу у инфламаторном процесу пре регенерације ткива, јер ослобађају проинфламаторне и антиинфламаторне молекуле.Открили су да комбинација неутрофила и активираних тромбоцита има више позитивних него негативних ефеката на поправку ткива.Такође су истакли да је пластичност моноцита важна за неинфламаторну и репаратурну функцију у обнављању ткива.
Извештај о шеми припреме ПРП-а у клиничким истраживањима је веома недоследан.Већина објављених студија није предложила метод припреме ПРП-а потребан за поновљивост шеме.Не постоји јасан консензус међу индикацијама лечења, тако да је тешко упоредити ПРП производе и њихове сродне резултате лечења.У већини пријављених случајева, терапија концентрације тромбоцита се класификује под термином „ПРП“, чак и за исту клиничку индикацију.За неке области медицине (као што су ОА и тендиноза), напредак је постигнут у разумевању промена ПРП препарата, путева испоруке, функције тромбоцита и других компоненти ПРП-а које утичу на поправку ткива и регенерацију ткива.Међутим, потребна су даља истраживања како би се постигао консензус о ПРП терминологији која се односи на ПРП биолошке агенсе у циљу потпуног и безбедног лечења одређених патологија и болести.
Статус ПРП система класификације
Употреба аутологне ПРП биотерапије је проблематична због хетерогености ПРП препарата, недоследног именовања и лоше стандардизације смерница заснованих на доказима (односно, постоји много метода припреме за производњу бочица за клиничко лечење).Може се предвидети да апсолутни садржај ПРП, чистоћа и биолошке карактеристике ПРП-а и сродних производа значајно варирају и утичу на биолошку ефикасност и резултате клиничких испитивања.Избор уређаја за припрему ПРП уводи прву кључну варијаблу.У клиничкој регенеративној медицини, практичари могу да користе две различите опреме и методе за припрему ПРП.Препарат користи стандардни сепаратор крвних зрнаца, који делује на комплетну крв прикупљену сам.Ова метода користи технологију одвајања бубња или диска центрифуге са континуираним протоком и тврде и меке кораке центрифуге.Већина ових уређаја се користи у хирургији.Друга метода је употреба гравитационе центрифугалне технологије и опреме.Центрифугирање високе Г силе се користи за одвајање жутог слоја ЕСР од јединице крви која садржи тромбоците и бела крвна зрнца.Ови уређаји за концентрацију су мањи од сепаратора крвних зрнаца и могу се користити поред кревета.У разлици г – Сила и време центрифугирања доводе до значајних разлика у приносу, концентрацији, чистоћи, виталности и активираном стању изолованих тромбоцита.Многи типови комерцијалне опреме за припрему ПРП-а могу се користити у потоњој категорији, што доводи до даљих промена у садржају производа.
Недостатак консензуса о начину припреме и валидацији ПРП-а и даље доводи до недоследности ПРП третмана, а постоје и огромне разлике у припреми ПРП-а, квалитету узорка и клиничким резултатима.Постојећа комерцијална ПРП опрема је верификована и регистрована према спецификацијама власничког произвођача, чиме се решавају различите варијабле међу тренутно доступном ПРП опремом.
Разумети дозу тромбоцита ин витро и ин виво
Терапеутски ефекат ПРП-а и других концентрата тромбоцита потиче од ослобађања различитих фактора укључених у поправку и регенерацију ткива.Након активације тромбоцита, тромбоцити ће формирати тромбоцитни тромб, који ће служити као привремени екстрацелуларни матрикс за промовисање пролиферације и диференцијације ћелија.Стога је поштено претпоставити да ће већа доза тромбоцита довести до веће локалне концентрације биоактивних фактора тромбоцита.Међутим, корелација између дозе и концентрације тромбоцита и концентрације ослобођеног биоактивног фактора раста тромбоцита и лека може бити неконтролисана, јер постоје значајне разлике у основном броју тромбоцита између појединачних пацијената, а постоје и разлике између метода припреме ПРП.Слично, неколико фактора раста тромбоцита укључених у механизам поправке ткива присутно је у плазма делу ПРП (на пример, фактор раста јетре и фактор раста 1 сличан инсулину).Стога, већа доза тромбоцита неће утицати на потенцијал поправке ових фактора раста.
Ин витро ПРП истраживања су веома популарна јер се различити параметри у овим студијама могу прецизно контролисати и брзо добити резултати.Неколико студија је показало да ћелије реагују на ПРП на начин који зависи од дозе.Нгуиен и Пхам су показали да веома високе концентрације ГФ-а нису нужно биле погодне за процес ћелијске стимулације, што би могло бити контрапродуктивно.Неке ин витро студије су показале да високе концентрације ПГФ-а могу имати штетне ефекте.Један од разлога може бити ограничен број рецептора ћелијске мембране.Стога, када је ниво ПГФ превисок у поређењу са доступним рецепторима, они ће имати негативан утицај на функцију ћелије.
Значај података о концентрацији тромбоцита ин витро
Иако истраживање ин витро има много предности, оно има и неке недостатке.Ин витро, због непрекидне интеракције између многих различитих типова ћелија у било ком ткиву због структуре ткива и ћелијског ткива, тешко је реплицирати ин витро у дводимензионалном окружењу једне културе.Густина ћелија која може утицати на пут ћелијског сигнала је обично мања од 1% стања ткива.Дводимензионално ткиво посуде за културу спречава да ћелије буду изложене екстрацелуларном матриксу (ЕЦМ).Поред тога, типична технологија културе ће довести до акумулације ћелијског отпада и континуиране потрошње хранљивих материја.Због тога се ин витро култура разликује од било ког стања стабилног стања, снабдевања ткива кисеоником или изненадне размене медијума за културу, а објављени су противречни резултати, упоређујући клинички ефекат ПРП-а са ин витро студијом специфичних ћелија, типова ткива и тромбоцита. концентрације.Грацијани и други.Утврђено је да је ин витро највећи ефекат на пролиферацију остеобласта и фибробласта постигнут при концентрацији ПРП тромбоцита 2,5 пута већој од почетне вредности.Насупрот томе, клинички подаци које су дали Парк и колеге показали су да након фузије кичме, ниво ПРП тромбоцита треба да се повећа за више од 5 пута од почетне вредности да би се индуковали позитивни резултати.Такође су пријављени слични контрадикторни резултати између података о пролиферацији тетива ин витро и клиничких резултата.
(Садржај овог чланка се поново штампа, а ми не дајемо никакву изричиту или имплицирану гаранцију за тачност, поузданост или потпуност садржаја садржаног у овом чланку, и нисмо одговорни за мишљења у овом чланку, молимо вас да разумете.)
Време поста: мар-01-2023